2002, Cilt 32, Sayı 3-4, Sayfa(lar) 247-249 |
[ İngilizce Özet ]
[ PDF ]
[ Benzer Makaleler ]
|
HGV RNA'nın Saptanmasında Touchdown-PCR'ın Önemi |
Ayhan Pekbay1, Meryem Çetin1, Abdülkerim Bedir2, Ahmet Saniç1, Murat Günaydın1 |
1Ondokuz Mayıs Üniversitesi Tıp Fakültesi, Mikrobiyoloji ve Klinik Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, Samsun 2Ondokuz Mayıs Üniversitesi Tıp Fakültesi, Biyokimya Anabilim Dalı, Samsun |
Anahtar Sözcükler: Touchdown-PCR, optimizasyon |
Polimeraz zincir reaksiyonunun (PCR) kullanıldığı çalışmalarda optimizasyon önemlidir. Touchdown PCR (TDPCR), optimizasyonda farklı bir yaklaşımı temsil etmektedir ve optimizasyon primerlerin annealing (yapışma) ısısı üzerine odaklanmaktadır. Annealing ısısı, tek bir siklusun seyri süresince, ardışık olarak azalarak düzenlenmektedir. Çalışmamızda, 97 kronik karaciğer hastasında, hepatit G virusu'nun (HGV) 5'-non-coding bölge (5'-NCR) ve nonstrüktürel- 5a (NS5a) kodlayıcı genom bölgelerine yönelik primerler kullanılarak reverse transcriptase PCR (RTPCR) yöntemi ile serumda HGV-RNA varlığı araştırılmıştır. NS5a bölgesine yönelik iki primerin erime (Tm) dereceleri birbirinden çok farklı olduğu için çok sayıda nonspesifik band oluşmuştur. Bunun üzerine touchdown PCR (TD-PCR) tekniği kullanılarak testler tekrarlanmış, nonspesifik bandların oldukça azaldığı veya kaybolduğu ve istenilen ürünlere ait bandların daha belirgin olduğu gözlenmiştir.
Termal cycler programında TD-PCR tekniğinin kullanılması ürün verimini ve özgüllüğünü arttırmaktadır.
|
[ İngilizce Özet ]
[ PDF ]
[ Benzer Makaleler ]
|